種類之多我相信不需我多說(shuō),不管是懂還是不懂得人都知道。所以我們?cè)谶x擇上也就存在很多不確定性。不知道哪種才是你需要的,哪種才是適合的。針對(duì)這個(gè)問(wèn)題,德晟作為生物緩沖劑的廠家,教你如何選擇。
緩沖范圍
每個(gè)緩沖液的pH值范圍內(nèi)的緩沖能力最高。該容量通常由緩沖區(qū)的pKa決定。您必須選擇pKa值接近所需范圍中間值的緩沖液(通常,建議使用pKa值至少在目標(biāo)pH值的一個(gè)pH單位內(nèi)的緩沖液)。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的pH值變化
重要的是要考慮在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中pH值可能會(huì)升高還是降低。如果您期望pH值會(huì)增加,則必須選擇pKa稍高于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)的最佳值的緩沖液。相反的情況也一樣:如果期望pH值降低,則選擇pKa較低的緩沖液。
緩沖液濃度
必須調(diào)整緩沖液的濃度,以具有足夠的容量供實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)使用。總之,如果緩沖液的濃度太低,它將無(wú)法穩(wěn)定溶液的pH值。相反,如果濃度太高,則緩沖液很可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)。通常,建議使用高于25 mM的濃度。
對(duì)于不主動(dòng)交換氫質(zhì)子的系統(tǒng),通常建議濃度為25-100mM。對(duì)于可能發(fā)生質(zhì)子交換的系統(tǒng),建議使用比被交換質(zhì)子的摩爾濃度高20倍的緩沖劑濃度。
在制備緩沖溶液時(shí),切記將溶液濃度調(diào)至預(yù)定使用濃度。
溫度變化
必須根據(jù)將要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的溫度來(lái)設(shè)置緩沖溶液的pH。溫度直接影響緩沖液的pKa,進(jìn)而影響系統(tǒng)的pH值和緩沖能力。在生物系統(tǒng)中這種情況可能非常關(guān)鍵,在生物系統(tǒng)中,需要準(zhǔn)確的氫離子濃度才能使反應(yīng)系統(tǒng)以最高效率運(yùn)行。
某些緩沖液(例如PIPES)的pKa對(duì)溫度變化不太敏感,但是,其他選項(xiàng)(如TRIS,TAPS,TES或Tricine)受這些變化的影響更大。