化學(xué)發(fā)光試劑吖啶酯的發(fā)光機(jī)理:
在堿性H2O2 溶液中,分子受到過氧化氫離子進(jìn)攻時(shí),生成不穩(wěn)定的二氧乙烷,此二氧乙烷分解為CO2和電子激發(fā)態(tài)的N-甲基吖啶酮,當(dāng)其回到基態(tài)時(shí)發(fā)出最大發(fā)射波長為430nm 的光子。2、吖啶酯或吖啶磺酰胺類化合物化學(xué)發(fā)光不需要催化劑,在有H2O2的稀堿性溶液中即能發(fā)光。
因此應(yīng)用于化學(xué)發(fā)光檢測(cè)具有許多優(yōu)越性:
1、背景發(fā)光低,信噪比高;5、標(biāo)記物穩(wěn)定( 在2 - 8 ℃下可保存數(shù)月之久)。
吖啶酯或吖啶磺酰胺是一類非常有效、非常好的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物。
吖啶酯或吖啶磺酰胺類化合物應(yīng)用于化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA),通常采用的體系是Acridinium ester/ H2O2 系統(tǒng)。 即用吖啶酯或吖啶磺酰胺標(biāo)記抗體或抗原, 用HNO3+ H2O2 和NaOH 作發(fā)光啟動(dòng)試劑。有些在發(fā)光啟動(dòng)試劑中加入Triton X - 100 , CTAC , Tween - 20 等表面活性劑以增強(qiáng)發(fā)光。