化學(xué)名:2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonicacid 中文名:羥乙基哌嗪乙硫磺酸 分子式:C8H18N2O4S。HEPES 它是一種兩性離子有機(jī)化學(xué)緩沖劑,對(duì)細(xì)胞無毒性作用,同時(shí)它也是一種氫離子緩沖劑,能較長(zhǎng)時(shí)間控制恒定的PH值范圍,在PH值為7.2-7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力。
好的HEPES緩沖液具有以下特征:
1、pKa值介于6.0和8.0之間
2、高溶解度
3、膜不透性
4、對(duì)生化反應(yīng)影響有限
5、極低的可見光和紫外線吸收
6、耐化學(xué)作用和酶解作用
7、易于制備
廣泛用于多種生物化學(xué)反應(yīng),并在某些細(xì)胞培養(yǎng)基中用作緩沖試劑,它最大的優(yōu)點(diǎn)是在開放式培養(yǎng)或細(xì)胞觀察時(shí)能維持較恒定的PH值。細(xì)胞培養(yǎng)基中的HEPES濃度范圍為10mM至25mM,注意HEPES不為細(xì)胞供給營(yíng)養(yǎng),只有在細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要長(zhǎng)時(shí)間在CO2培養(yǎng)箱外處理細(xì)胞時(shí),才將其加入培養(yǎng)基,增強(qiáng)緩沖能力。
HEPES的使用方法有兩種:
1、按照所需濃度直接加入到配置的培養(yǎng)溶液中,過濾除菌,每1000毫升培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,溶解后用1N NaOH調(diào)PH至7.2,過濾除菌后可使用。此時(shí)HEPES的使用濃度為10mmol/L。
2、配成100x貯存液(1mol/L),取23.8gHEPES溶于90ml的雙蒸水中,用1NNaOH調(diào)PH至7.5-8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌分小瓶裝,4攝氏度至20攝氏度保存。使用前取99ml培養(yǎng)液加入1ml貯存液最終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L
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